細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備配置及用途
1. 烘箱(干燥箱)
用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí),烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上,通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好,缺點(diǎn)是升溫過程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開始,至100℃時(shí),停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂,應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。
2. 水純化裝置
細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的質(zhì)量要求較高,細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細(xì)胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過嚴(yán)格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式、臺(tái)式、可配儲(chǔ)水箱、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類實(shí)驗(yàn)用水要求選擇配置殺菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的超濾型純水裝置。
3. 冰箱
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室必備設(shè)備,應(yīng)專用,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì),且應(yīng)保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。
普通冰箱:儲(chǔ)存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,可短期保存組織樣本。
-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱:用于儲(chǔ)存需要冷凍以保持生物活性以及需長時(shí)期存放的制劑,如酶、血清等。
4. 細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器
儲(chǔ)存器常用的液氮容器,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時(shí)需要考慮三個(gè)因素:容積大小、取放使用方便、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲(chǔ)存1ml的凍存管250-15000個(gè)左右。液氮溫度低文帝可達(dá)-196℃,使用時(shí)應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),需注意觀察剩余液氮量,及時(shí)補(bǔ)充,避免液氮不足使細(xì)胞受損或死亡。目前有許多智能型細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器可供選擇,可配置有電子控制器的液氮儲(chǔ)存器,實(shí)現(xiàn)凍存自動(dòng)化;并可監(jiān)測(cè)液氮水平和樣品溫度,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn);可配置報(bào)警系統(tǒng),設(shè)置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報(bào)警;同時(shí)具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐,從而更有效地保護(hù)樣品,防止容器內(nèi)升溫。另外,可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲(chǔ)存罐補(bǔ)充液氮,保證樣品安全。
5. 離心機(jī)
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常使用離心機(jī)制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌和收集細(xì)胞。一般常規(guī)配置4000rpm臺(tái)式離心機(jī);若要做細(xì)胞沉降,需要使用80-100G離心力,因?yàn)殡x心力過大會(huì)損傷細(xì)胞。根據(jù)不同要求,有大容量、可調(diào)溫度離心機(jī)、高速離心機(jī)和低溫冷凍離心機(jī)等更多功能離心機(jī)可選擇。
6. 天平
常用的有精密天平和分析天平。分析天平的精確度一般為0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根據(jù)取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大于100mg宜選用精確度0.1mg的天平;取樣量100-10mg,選用精確度0.01mg的天平;取樣量10mg宜選用精確度0.001mg的天平。天平需要定期校準(zhǔn),可選擇有自動(dòng)校準(zhǔn)功能的天平,方便維護(hù)。天平使用需要注意清潔,避免腐蝕性粉末、液體直接接觸稱量臺(tái)。
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