海藻糖的提取方法
由于海藻糖所表現(xiàn)出的獨(dú)特的生物學(xué)活性，引起了人們的廣泛關(guān)注，因此各國科學(xué)家投入巨大精力對其生產(chǎn)技術(shù)進(jìn)行了大量的研究。海藻糖的制備方法目前包括微生物抽提法、微生物發(fā)酵法、酶合成法、基因工程法等。
微生物提取法
微生物提取法是以酵母、霉菌及其他含海藻糖的微生物為提取源。首先通過改變微生物的生長條件，使其體內(nèi)積累更多的海藻糖，然后采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒑Ｔ逄翘崛〕鰜�。其工藝流程一般是：活性干酵母提取冷卻離心上清液濃縮去醇去離子和蛋白濃縮結(jié)晶-過濾干燥成品。
微生物提取法所用的微生物一般是酵母菌。因?yàn)榻湍妇趯?shù)生長期如處于"饑餓"狀態(tài)(降低碳源、氮源)，或提高溫度、高滲透壓等條件下，體內(nèi)海藻糖的含量明顯增加，可達(dá)細(xì)胞干重的20%。
國內(nèi)外對高產(chǎn)海藻糖菌株的選育、胞內(nèi)海藻糖的提取、純化等方面進(jìn)行了大量的研究。哥米（Gomes）等選育出兩株酵母菌，它們在熱擊條件下可大量合成海藻糖。邵漪等在70℃條件下使用60%70%的乙醇對活性干酵母進(jìn)行提取，經(jīng)后續(xù)處理最終海藻糖得率為11g/100g干酵母。韓少卿等使用膜裝置對機(jī)體內(nèi)海藻糖進(jìn)行分離提取，海藻糖提取率達(dá)到85%以上，純度在99%以上。
目前這種工藝已相當(dāng)成熟，但由于生產(chǎn)成本過高、收率較低的缺點(diǎn)未能在食品工業(yè)中得到廣泛應(yīng)用。
微生物發(fā)酵法
微生物發(fā)酵法顧名思義即通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)海藻糖，再從發(fā)酵液中分離純化，最終制得成品。
通過誘變、細(xì)胞融合及基因重組等方法選育出高產(chǎn)海藻糖的菌株，采用高濃度的培養(yǎng)基及高滲發(fā)酵，并在發(fā)酵結(jié)束前，讓菌體"饑餓"2-3h，可得到含海藻糖高的產(chǎn)物。
肖冬光等采用誘變、基因重組選育海藻糖生產(chǎn)菌株，胞內(nèi)海藻糖含量達(dá)23~25%，通過氮饑餓、熱休克培養(yǎng)應(yīng)激酵母細(xì)胞，休克處理合成胞外海藻糖，海藻糖含量可達(dá)10~16g/L，經(jīng)超濾、離交，海藻糖收率＞80%，結(jié)晶收率89%，海藻糖純度＞99%。趙玉巧等對產(chǎn)海藻糖啤酒酵母進(jìn)行培養(yǎng)優(yōu)化，最終發(fā)酵液中海藻糖的質(zhì)量濃度可以達(dá)到1072mg/L。
該方法轉(zhuǎn)化率低，副產(chǎn)物多，在食品行業(yè)中也未大范圍應(yīng)用。
酶合成法
酶法生產(chǎn)主要是以葡萄糖、麥芽糖或者淀粉為底物，通過與海藻糖合成有關(guān)的酶的作用，轉(zhuǎn)化為海藻糖。
以淀粉為底物生產(chǎn)海藻糖，底物淀粉主要是馬鈴薯、甘薯、玉米、小麥、木薯五種，其中以木薯淀粉為原料海藻糖生成率高。也有文獻(xiàn)介紹直接以麥芽糖為底物，使用海藻糖合酶生產(chǎn)海藻糖。不同的菌種海藻糖合酶酶解得率不同，其中以棲熱水生菌海藻糖合成酶產(chǎn)率高，收率可以達(dá)到80%以上。
2000年，南寧中諾生物工程有限責(zé)任公司成功開發(fā)出酶法轉(zhuǎn)化木薯淀粉生產(chǎn)海藻糖的工藝，使我國成為世界上第二個(gè)酶法工業(yè)化生產(chǎn)海藻糖的國家。該工藝?yán)媚臼淼矸塾?淀粉酶、普魯蘭酶分解為短鏈糊精后，經(jīng)海藻糖合酶作用轉(zhuǎn)化生產(chǎn)海藻糖，精制后可制成含量為98.0%的食品級結(jié)晶海藻糖和含量為99.0%以上的高純度結(jié)晶海藻糖。
