凈環(huán)球凈化可提供實(shí)驗(yàn)室、第三方檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、微生物實(shí)驗(yàn)室的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建方案
(一)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室與其他一般實(shí)驗(yàn)室的主要區(qū)別在于要求保持無(wú)菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為以下幾個(gè)區(qū)：無(wú)菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲(chǔ)藏。
1.無(wú)菌操作區(qū)
(1)無(wú)菌操作室：無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域，盡量能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾，一般地理位置在部分。
理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分：
a)較衣室---供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b)緩沖間---位于較衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境，同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c)無(wú)菌操作間---于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。其大小要適當(dāng)，且其**部不宜過(guò)高(不**過(guò)2.5m)以保證紫外線的有效滅菌效果；墻壁光滑無(wú)死角以便清潔和消毒。工作臺(tái)安置不應(yīng)靠墻壁，臺(tái)面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
(2)凈化工作臺(tái)：操作簡(jiǎn)單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：a) 側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。
凈化工作臺(tái)工作原理(大致相同)---通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)空氣過(guò)濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。
凈化工作臺(tái)應(yīng)用注意：
(1)凈化工作臺(tái)應(yīng)安裝在隔離好的無(wú)菌間或清潔無(wú)塵的房間內(nèi)，以免塵土過(guò)多易使過(guò)濾器阻塞，降低凈化效果，縮短其使用壽命。
(2)新安裝的或長(zhǎng)期未使用的工作臺(tái)，工作前必須對(duì)工作臺(tái)和周圍環(huán)境用真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具進(jìn)行清潔工作，然后再采用藥物滅菌法或紫外線滅菌進(jìn)行滅菌處理。
(3)使用凈化工作臺(tái)前，應(yīng)先用75%酒精擦洗臺(tái)面，并提前以紫外線滅菌燈照射30~50min處理凈化工作區(qū)內(nèi)積存的微生物。關(guān)閉滅菌燈后應(yīng)啟動(dòng)風(fēng)機(jī)使之運(yùn)轉(zhuǎn)兩分鐘后再進(jìn)行培養(yǎng)操作。
(4)凈化工作區(qū)內(nèi)不應(yīng)存放不必要的物品，以保持潔凈氣流流型不受干擾。
(5)注意凈化區(qū)內(nèi)氣流的變化，一旦感到氣流變?nèi)酰缇凭珶艋鹧娌粍?dòng)，加大電機(jī)電壓仍未見情況改變則說(shuō)明濾器已被阻塞，應(yīng)及時(shí)更換。一般情況下，過(guò)濾器三年更換一次。更換高過(guò)濾器應(yīng)請(qǐng)人員操作，以保持密封良好。粗過(guò)濾器中的過(guò)濾布(無(wú)紡布)應(yīng)定期清洗更換，時(shí)間應(yīng)根據(jù)工作環(huán)境潔凈程度而定，通常間隔3-6個(gè)月進(jìn)行一次。
(6)凈化工作臺(tái)使用完畢應(yīng)及時(shí)清理工作臺(tái)面上的物品并用酒精擦洗臺(tái)面使之始終保持潔凈。
(7)凈化工作臺(tái)應(yīng)定期進(jìn)行功能測(cè)試，檢查凈化工作臺(tái)各項(xiàng)工作指標(biāo)是否達(dá)到要求，例如進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)，定期檢查臺(tái)面空氣的潔凈度是否達(dá)標(biāo)。
**凈工作臺(tái)的無(wú)菌程度檢查，**凈工作臺(tái)在消毒處理后，無(wú)菌試驗(yàn)前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數(shù)；取直徑約90mm平皿，在**凈工作臺(tái)內(nèi)點(diǎn)燃酒精燈，在酒精燈旁，以無(wú)菌操作，將平皿半開注入溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約20ml，制成平板，在30~35℃預(yù)培養(yǎng)48小時(shí)，無(wú)菌后將平板3個(gè)，以無(wú)菌方式帶入**凈工作臺(tái)內(nèi)左、中、右各放一個(gè)；打開平皿蓋扣置，平板在空氣中暴露30分鐘后將平皿蓋蓋好，置30~35℃培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查，100 級(jí)清潔度要求： 3個(gè)平皿上生長(zhǎng)的菌落數(shù)平均不得**過(guò)1個(gè)。
**凈工作臺(tái)應(yīng)定期檢查其潔凈度，應(yīng)達(dá)到100級(jí)(一般用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀)檢測(cè)塵埃粒徑≤5衸的粒數(shù)不得**過(guò)3.5個(gè)/升；空氣流量應(yīng)控制在0.75~1. 0m3/s；菌落數(shù)平均<1個(gè)，可根據(jù)無(wú)菌狀況必要時(shí)置換過(guò)濾器。
2.孵育區(qū)
本區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需清潔無(wú)塵，因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來(lái)往穿行的區(qū)域。
3.制備區(qū)
在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
4.儲(chǔ)藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等，此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵。
5.清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。
