無菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分:較衣室、緩沖間、無菌操作間。較衣室供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩;緩沖間位于較衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境。無菌操作間于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng);其大小要適當(dāng),且其**部不宜過高,不**過2.5m,以保證紫外線的效果;墻壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應(yīng)靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。清潔和消毒區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開,主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。儲藏區(qū):主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴(yán)格,但仍需清潔無塵,因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行,后者費(fèi)用高,一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作。制備區(qū):在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。 工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式;外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動,因而外方氣流不致混入操作,工作臺結(jié)構(gòu)為開放式,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作對操作者不利。**凈工作臺應(yīng)需要定期請有關(guān)部門檢查潔凈度,符合要求的**凈工作臺其潔凈度應(yīng)達(dá)到100級,用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)**過3.5個/L;空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s;菌落數(shù)平均<1個,根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器。