在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中,真菌、噬菌體和支原體污染極為常見且處理棘手。真菌于培養(yǎng)基上形成肉眼可見菌落,像霉菌的絲狀、管狀或樹枝狀菌絲,其消耗營養(yǎng)、抑制細(xì)胞生長并可能產(chǎn)毒威脅人員健康。噬菌體在液體培養(yǎng)基中致溶氧急升、氣泡涌現(xiàn)與菌體自溶,固體培養(yǎng)基上有噬菌斑,傳播迅速,嚴(yán)重干擾工業(yè)生產(chǎn)。支原體因微小難被光學(xué)顯微鏡察覺,污染細(xì)胞后生長緩慢、形態(tài)改變、培養(yǎng)基變色,還可借氣溶膠擴(kuò)散污染同室細(xì)胞。這些污染不僅干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果、致實(shí)驗(yàn)失敗、損實(shí)驗(yàn)設(shè)備、增成本,還威脅人員健康,故實(shí)驗(yàn)室污染防控意義重大,需有效消毒與規(guī)范操作降風(fēng)險。
一、污染來源與傳播路徑
(一)真菌
其來源多元,培養(yǎng)箱內(nèi)部、不潔操作環(huán)境(實(shí)驗(yàn)臺面、通風(fēng)系統(tǒng)等)、不規(guī)范操作的實(shí)驗(yàn)人員(手部、衣物攜菌)以及受污的培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料均可成為源頭。傳播主要靠空氣流動與接觸。
(二)噬菌體
可經(jīng)未清潔滅菌的實(shí)驗(yàn)器具(培養(yǎng)皿、移液器等)、故障或破損濾膜的空氣過濾系統(tǒng)致空氣傳播、操作不當(dāng)?shù)娜藛T(未規(guī)范防護(hù))以及發(fā)酵設(shè)備(攪拌器、管道等)污染而傳播。
(三)支原體
常見于細(xì)胞培養(yǎng)過程,工作環(huán)境塵埃、器材攜帶、不規(guī)范操作的人員、受污培養(yǎng)材料及原始組織器官均可引發(fā)污染,受染細(xì)胞還會造成交叉污染。
二、傳統(tǒng)消毒之困
(一)酒精
因真菌細(xì)胞壁特殊、噬菌體寄生細(xì)菌內(nèi)、支原體種類抗性差異,對三者消毒效果受限,且易揮發(fā)不穩(wěn)定,難長效作用。
(二)臭氧
半衰期短(15 - 20 分鐘),受溫濕度影響大,對真菌深層結(jié)構(gòu)、噬菌體內(nèi)部及支原體難以徹底消殺。
(三)紫外線
穿透力弱,有消毒死角,對真菌孢子、復(fù)雜結(jié)構(gòu)的噬菌體與微小的支原體難以徹底清除,且受距離、照射時間影響,超 2 米效果大減。
三、高效消毒服務(wù)方案
(一)專業(yè)消毒劑
如諾福、諾安心殺孢子劑等,諾福殺菌效力達(dá) 10 - 6 次方,能滅多種微生物,使用時無色無味、無毒無殘留,對人和環(huán)境友好,具良好材料兼容性、穩(wěn)定殺菌性、無耐藥性,獨(dú)特殺菌機(jī)制破壞微生物細(xì)胞壁與細(xì)胞膜。可多種方式消毒,操作簡便高效。
(二)消毒設(shè)備
歐菲姆系列滅菌儀表現(xiàn)突出。歐菲姆 OXY - TM 過氧化氫消毒機(jī)能將過氧化氫霧化成 5 微米干霧顆粒,30 分鐘達(dá)滅菌級,擴(kuò)散性佳無死角。歐菲姆 KVBOX 滅菌儀可使過氧化氫成微細(xì)干霧滲進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱各角落,適用于多種密閉空間。眾多實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用案例證實(shí)其對霉菌、支原體、噬菌體污染治理有效。
四、消毒服務(wù)流程
(一)污染檢測評估
收集實(shí)驗(yàn)室信息(使用頻率、實(shí)驗(yàn)類型、人員流動等),用顯微鏡觀察、培養(yǎng)基培養(yǎng)、PCR 檢測等法查真菌、噬菌體、支原體污染狀況,評估程度與范圍,為方案定制奠基。
(二)定制方案
依檢測結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室實(shí)情,真菌污染重區(qū)域選含氯或過氧乙酸等化學(xué)消毒劑并增頻次;噬菌體污染用核酸氣溶膠污染清除劑并重點(diǎn)處理涉器具;支原體污染采過氧化氫或紫外與化學(xué)消毒劑結(jié)合法,確定消毒時間、步驟與防護(hù)措施。
(三)實(shí)施消毒
人員防護(hù)完備后依方案對實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域與設(shè)備消毒,表面擦拭噴霧,空間用設(shè)備全覆蓋,嚴(yán)守規(guī)程保徹底安全,后檢測評估效果。
五、污染預(yù)防舉措
(一)強(qiáng)化管理
健全制度,明確區(qū)域功能與操作流程,實(shí)驗(yàn)用品分類存標(biāo)清,定期查維設(shè)備,規(guī)范廢棄物管理。
(二)優(yōu)化操作
減氣溶膠產(chǎn)生(移液控速力避飛濺),易污操作入生物安全柜,器具用前消滅用后清理,優(yōu)樣本流程保質(zhì)量安全。
(三)人員培訓(xùn)
定期組織培訓(xùn),使其悉安全規(guī)范與流程,內(nèi)容涵蓋污染特點(diǎn)、途徑、預(yù)防及消毒設(shè)備與劑的用法,借案例與實(shí)操提防控與應(yīng)急力,強(qiáng)責(zé)任心與協(xié)作精神護(hù)實(shí)驗(yàn)室清潔安全。
六、成功案例見證
某高校生物實(shí)驗(yàn)室受真菌、噬菌體和支原體污染致科研受阻,克微生物檢測評估后用諾福與歐菲姆滅菌儀消毒,污染受控,環(huán)境改善,科研推進(jìn)。某制藥企業(yè)研發(fā)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)遭支原體污染,經(jīng)克微生物以過氧化氫干霧消毒并處理關(guān)鍵設(shè)備,支原體除,培養(yǎng)正常,省時省本。某科研單位細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室因噬菌體污染細(xì)胞培養(yǎng)失敗,克微生物精準(zhǔn)檢測、針對性清除并全面消毒后恢復(fù)正常運(yùn)轉(zhuǎn)。這些案例彰顯克微生物在解決實(shí)驗(yàn)室污染方面的卓越成效。
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