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酵母雙雜交系統(tǒng)

  • 發(fā)布時間:2025-10-09 11:24:39,加入時間:2013年09月21日(距今4437天)
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Grow´n´Glow ACE1 Yeast Two Hybrid System;Grow´n´Glow ACE1

特點和優(yōu)點:

1. 可以篩選不同蛋白-蛋白之間相互作用的強度;

2. 利用銅誘導(dǎo)的CUP1/ACE1系統(tǒng)能更有效的檢測體內(nèi)蛋白相互作用;

3. 利用銅抗性這種嚴格的篩選,會出現(xiàn)很少的假陽性;

4. 利用GFP這種綠色熒光蛋白的報告基因,篩選陽性菌株可以節(jié)省大量的時間;

5. 篩選陽性菌株不需要外部酶底物,如X-Gal;

6. 適合高通量的篩選分析。

產(chǎn)品介紹:

是一種用于篩選體內(nèi)蛋白-蛋白之間相互作用的方法,它依賴于DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和DNA激活結(jié)構(gòu)域的分離,并將這兩個結(jié)構(gòu)域基因分別與兩個蛋白基因融合在一起,如果兩種蛋白能夠相互作用,就會使這兩個結(jié)構(gòu)域重組成一個有活性的轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物,這樣,就會使報告基因得以表達。

MoBiTec的ACE1雙雜交系統(tǒng)是一個強大的工具,它可以用于新基因的發(fā)現(xiàn)和功能分析,而且可以有效的鑒別體內(nèi)蛋白-蛋白的作用。它將銅誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子ACE1和銅抗性CUP1基因與作為報告基因綠色熒光蛋白GFP基因結(jié)合起來。

兩種相互作用的蛋白分別與ACE1的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和DNA激活結(jié)構(gòu)域相融合,從而使我們可以通過下面的方法篩選:

1.在含銅的培養(yǎng)基上生長的細胞;

2.依賴銅表達的強熒光GFP可以通過紫外光檢測到。

因此,這種新技術(shù),可以很有效的通過一步法篩選可能的陽性表達,即在含有銅的培養(yǎng)基上生長并發(fā)出綠色熒光的菌株。它是一種快速、高靈敏度和更值得信賴的檢測方法。不斷改變銅濃度還可以篩選出不同蛋白之間相互作用的強度。

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