細胞培養(yǎng)實驗室設(shè)備配置及用途
1. 烘箱(干燥箱)
用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內(nèi)溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂,應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。
2. 水純化裝置
細胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,細胞培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過嚴(yán)格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式、臺式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類實驗用水要求選擇配置殺菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的超濾型純水裝置。
3. 冰箱
細胞培養(yǎng)實驗室必備設(shè)備,應(yīng)專用,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質(zhì),且應(yīng)保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。
普通冰箱:儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,可短期保存組織樣本。
-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱:用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑,如酶、血清等。
4. 細胞冷凍儲存器
儲存器常用的液氮容器,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時需要考慮三個因素:容積大小、取放使用方便、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲存1ml的凍存管250-15000個左右。液氮溫度低文帝可達-196℃,使用時應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),需注意觀察剩余液氮量,及時補充,避免液氮不足使細胞受損或死亡。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇,可配置有電子控制器的液氮儲存器,實現(xiàn)凍存自動化;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點;可配置報警系統(tǒng),設(shè)置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報警;同時具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐,從而更有效地保護樣品,防止容器內(nèi)升溫。另外,可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲存罐補充液氮,保證樣品安全。
5. 離心機
細胞培養(yǎng)時,通常使用離心機制備細胞懸液、調(diào)整細胞密度、洗滌和收集細胞。一般常規(guī)配置4000rpm臺式離心機;若要做細胞沉降,需要使用80-100G離心力,因為離心力過大會損傷細胞。根據(jù)不同要求,有大容量、可調(diào)溫度離心機、高速離心機和低溫冷凍離心機等更多功能離心機可選擇。
6. 天平
常用的有精密天平和分析天平。分析天平的精確度一般為0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根據(jù)取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大于100mg宜選用精確度0.1mg的天平;取樣量100-10mg,選用精確度0.01mg的天平;取樣量10mg宜選用精確度0.001mg的天平。天平需要定期校準(zhǔn),可選擇有自動校準(zhǔn)功能的天平,方便維護。天平使用需要注意清潔,避免腐蝕性粉末、液體直接接觸稱量臺。
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