應用：凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質(zhì)量和相對分子質(zhì)量分布，同時根據(jù)所用凝膠填料不同，可分離脂溶性和水溶性物質(zhì)，分離相對分子質(zhì)量的范圍從幾百萬到100以下。近年來，凝膠色譜也廣泛用于小分子化合物。相對分子質(zhì)量相近而化學結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)，不可能通過凝膠滲透色譜法達到完全分離純化的目的。凝膠色譜不能分辨分子大小相近的化合物，相對分子質(zhì)量相差需在10%以上才能得到分離。
原理：凝膠具有化學惰性，它不具有吸附、分配和離子交換作用。讓被測量的高聚物溶液通過一根內(nèi)裝不同孔徑的色譜柱，柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙（較大）和粒子內(nèi)的通孔（較�。．斁酆衔锶芤毫鹘�(jīng)色譜柱（凝膠顆粒）時，較大的分子（體積大于凝膠孔隙）被排除在粒子的小孔之外，只能從粒子間的間隙通過，速率較快；而較小的分子可以進入粒子中的小孔，通過的速率要慢得多；經(jīng)過一定長度的色譜柱，分子根據(jù)相對分子質(zhì)量被分開，相對分子質(zhì)量大的在前面（即淋洗時間短），相對分子質(zhì)量小的在后面（即淋洗時間長）。溶質(zhì)的淋出體積與其分子量有關，分子量愈大，其淋出體積愈小。
a. 常溫流動相: 水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟異丙醇、a-氯奈；
b. 高溫流動相：DMF（80℃），三氯苯；
c. 可以測相對分子量的流動相：水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟異丙醇、a-氯奈、三氯苯
d .可以測絕對分子量的流動相：水相、THF、DMF、三氯苯
不同流動相對應的分子量范圍：DMF：3000-100萬；THF：500-200萬；水相：300-50萬；氯仿相：500-200萬。分子量接近限值的，測試不太準確，低于下限會跟溶劑峰連在一起測不準。
1．樣品量：可為液體、粉末、塊狀樣品，粉末樣品10mg，液體5-10ml；
2．要求在指定流動相中有較好的溶解性，送樣前需要自行確認好樣品在指定流動相中的溶解性，難溶樣品自行溶好再送樣, 溶解后的樣品要透明均一，過濾頭不堵；如果樣品溶解性較差，要求提前溶解好（濃度要求在2-5mg /ml左右），或者提供合理溶解方法（如果由實驗室溶解，費用問題請?zhí)崆白稍儯?/p>
3．樣品溶好之后，有機相樣品需要過0.45 μm濾膜，水相樣品需要過0.22 μm濾膜，樣品濃度一般控制在2-5 mg/mL；樣品溶好過濾膜后，可能會損失部分樣品信息，建議送粉末；
4．高溫相要保證在該測試溫度下樣品不分解；并樣品不能含F(xiàn)，含F(xiàn)會分解污染柱子
1. 為什么樣品要求在指定流動相中溶解性要好？
因為GPC（凝膠滲透色譜）本質(zhì)上是一個色譜測試，是通過色譜柱分離不同分子量的成分，溶解性不好的話是需要過濾后測試的，不溶成分的分子量就無法測試，而且如果樣品溶解度差的話，樣品有可能會在色譜柱析出，毀壞柱子
2. 為什么測試結(jié)果跟預期分子量差別較大？
第一，gpc的測試原理是每種流動相都有對應的一種標準物質(zhì)作出的標準曲線，樣品測試結(jié)果要跟標曲比較，然后得出測試結(jié)果，所以大多數(shù)流動相得到的結(jié)果是樣品的相對分子量，如果樣品跟標準品差別太大的話，測試結(jié)果就有可能跟真實值相差較大；第二，GPC一般測試樣品都是聚合物，預期分子量只是基于實驗設計的一個預期值，所以有時候跟實際情況有出入也是正常的。
3. 相對分子量和絕對分子量的區(qū)別？
第一，測試原理不同：相對分子量時通過建立標準物質(zhì)的標準曲線，待測樣品與之相比得到分子量分布；絕對分子量是通過三聯(lián)檢測器，主要是激光檢測器在樣品顆粒表面散射角度不同通過數(shù)學模型計算分子量分布；第二，檢測器不同：相對分子量主要是折光示差檢測器，絕對分子量需要示差、粘度、光散射三聯(lián)檢測器；第三，檢測分子量范圍不同：相對分子量可以檢測較小分子量，而一般分子量在幾萬以上才適合絕對分子量
GPC各個流動相之間有什么差別？
不同流動相對應分子量范圍不同：DMF:3000-100萬；THF：500-200萬；水相300-50萬；氯仿500-200萬。高溫相要保證在該測試溫度下樣品不分解，目前高溫流動相是三氯苯相，是針對高溫溶解后降溫會析出的樣品，如果溶解后降溫不析出樣品可測常溫GPC。
