噬菌體污染是實(shí)驗(yàn)室中常見的問題,但可以采取一些方法來預(yù)防和清除噬菌體污染。噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、藻類 、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的總稱。作為病毒的一種,噬菌體具有病毒的一些特性:個(gè)體微小;不具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu);只含有單一核酸。其特別之處在于噬菌體是專以細(xì)菌為“食物”的病毒。
噬菌體污染:液體培養(yǎng)基溶氧急劇上升,產(chǎn)生大量氣泡,在較短時(shí)間內(nèi)菌體大量自溶,發(fā)酵液最終變清。固體培養(yǎng)基出現(xiàn)噬菌斑。
噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果:
能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生許多子代噬菌體,并最終裂解細(xì)菌,建立溶菌周期——毒性噬菌體(virulent phage)
噬菌體基因與宿主染色體整合,成為前噬菌體,細(xì)菌變成溶原性菌,不產(chǎn)生子代噬菌體,但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳代,建立溶原狀態(tài)——溫和噬菌體(temperate phage)
以下是針對細(xì)菌培養(yǎng)和相關(guān)實(shí)驗(yàn)過程中對噬菌體進(jìn)行預(yù)防和清除的一系列措施
預(yù)防噬菌體污染:
1. 采用無菌技術(shù):確保在實(shí)驗(yàn)中使用無菌技術(shù),包括使用無菌試劑和培養(yǎng)物,以減少噬菌體的引入。
2. 維護(hù)潔凈實(shí)驗(yàn)室環(huán)境:維持實(shí)驗(yàn)室的清潔,定期消毒實(shí)驗(yàn)室表面和設(shè)備,以減少噬菌體的傳播。
3. 遵循規(guī)范操作程序:遵守實(shí)驗(yàn)室安全和操作規(guī)程,包括正確處理和處置垃圾,以避免噬菌體污染的風(fēng)險(xiǎn)。
4. 儲存培養(yǎng)物:定期檢查并維護(hù)細(xì)菌培養(yǎng)物庫存,確保培養(yǎng)物的純度,以減少噬菌體感染的風(fēng)險(xiǎn)。
清除噬菌體污染:
1. 隔離被感染的細(xì)菌培養(yǎng)物:如果懷疑培養(yǎng)物受到噬菌體感染,將其與其他細(xì)菌隔離,以阻止感染傳播。
2. 使用抗噬菌體劑:一些抗噬菌體劑可以用于清除感染,如孤噬菌體(bacteriophage)的治療。
3. 凍存?zhèn)浞菖囵B(yǎng)物:定期凍存?zhèn)浞菖囵B(yǎng)物,以便在感染發(fā)生時(shí)能夠重新開始培養(yǎng)而不受噬菌體污染影響。
4. 使用PCR檢測:使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等分子生物學(xué)方法檢測噬菌體感染,以及監(jiān)測細(xì)菌培養(yǎng)物的純度。
5. 培養(yǎng)敏感細(xì)胞株:對于特別敏感的細(xì)胞株,可以選擇使用已知無噬菌體感染的培養(yǎng)物,以減少感染風(fēng)險(xiǎn)。
噬菌體污染可能會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不利影響,因此實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該采取預(yù)防措施并保持高度警惕,以減少噬菌體感染的可能性。如果感染已經(jīng)發(fā)生,及早采取清除措施是至關(guān)重要的。
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