細(xì)胞簡(jiǎn)介
人胚腎細(xì)胞株293插入SV40 T-抗原基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱為293T。該細(xì)胞最初的名字293tsA1609neo，攜帶SV40復(fù)制序列，被廣泛用于逆轉(zhuǎn)錄病毒生產(chǎn)、基因表達(dá)和蛋白表達(dá)。
培養(yǎng)信息
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細(xì)胞名稱 |
293T，HEK-293T，人胚腎細(xì)胞 |
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別稱 |
Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo |
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種屬來(lái)源 |
Homo sapiens, human |
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組織來(lái)源 |
kidney; Embryo |
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細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
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生物安全等級(jí) |
1級(jí) |
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傳代比例 |
1:3-1:5 |
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換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
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生長(zhǎng)培養(yǎng)基 |
10% FBS、高糖DMEM、1% Penicillin-Streptomycin |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：95% 空氣、5% CO2；溫度：37℃ |
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凍存條件 |
90% FBS + 10% DMSO；液氮 |
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支原體檢測(cè) |
陰性 |
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STR鑒定結(jié)果 |
D5S818: 8,9 D13S317: 12,14 D7S820: 11 D16S539: 9,13 vWA: 16,19 THO1: 7,9.3 Amelogenin: X TPOX: 11 CSF1PO: 11,12 |
1．293T貼壁能力較弱，加液、換液、洗滌時(shí)，須動(dòng)作輕柔，避免用液體直沖細(xì)胞，會(huì)造成細(xì)胞脫落。細(xì)胞生長(zhǎng)不能過(guò)密，過(guò)密細(xì)胞容易脫落，脫落下來(lái)的細(xì)胞可以通過(guò)離心收集，使用胰酶消化后繼續(xù)培養(yǎng)。
2．293T細(xì)胞狀態(tài)直接影響病毒包裝效率。當(dāng)細(xì)胞傳代次數(shù)過(guò)多、細(xì)胞增殖速度減緩、細(xì)胞貼壁能力非常弱（輕柔換液也能導(dǎo)致細(xì)胞半數(shù)脫落）時(shí)，說(shuō)明細(xì)胞狀態(tài)不好，會(huì)大幅降低病毒包裝效率。
3．使用高糖DMEM培養(yǎng)293T，低糖DMEM或者DMEM/F12等含糖量低的培養(yǎng)基可能影響293T細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
4．如果發(fā)生293T細(xì)胞不貼壁，漂浮在培養(yǎng)基中的現(xiàn)象，請(qǐng)確認(rèn)所使用的DMEM中碳酸氫鈉濃度及培養(yǎng)箱中CO2濃度。并參考以下培養(yǎng)體系：
DMEM由1.5 g/L碳酸氫鈉配制而成，使用5% CO2培養(yǎng)箱。
DMEM由3.7 g/L碳酸氫鈉配制而成，使用10% CO2培養(yǎng)箱。
當(dāng)使用碳酸氫鈉含量高的培養(yǎng)基時(shí)，必須將這些細(xì)胞在10% CO2中孵育，以便正確緩沖培養(yǎng)基。當(dāng)培養(yǎng)基沒(méi)有適當(dāng)緩沖時(shí)，293T細(xì)胞雖然可以存活，但將無(wú)法粘附并保持漂浮在培養(yǎng)基中。
5．培養(yǎng)時(shí)可酌情使用預(yù)鋪0.2%明膠的培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿，若細(xì)胞狀態(tài)好，可省略此步驟。
6．本細(xì)胞僅用于科學(xué)研究，不得用于臨床治療。
7．請(qǐng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
相關(guān)產(chǎn)品
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產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
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JY03011/JY03012 |
慢病毒濃縮試劑盒 |
50 mL/100 mL |
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JY03013/JY03014 |
PEG-8000慢病毒濃縮液 |
50 mL/100 mL |
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JY03061/JY03062 |
全套第二代慢病毒包裝質(zhì)粒（三質(zhì)粒系統(tǒng)） |
1 μg/100 μg |
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JY03063/JY03064 |
全套第三代慢病毒包裝質(zhì)粒（四質(zhì)粒系統(tǒng)） |
1 μg/100 μg |
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JY03027/JY03028 |
慢病毒包裝質(zhì)粒 pMD2.G |
1 μg/100 μg |
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JY03029/JY03030 |
慢病毒包裝質(zhì)粒 psPAX2 |
1 μg/100 μg |
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JY03031/JY03032 |
慢病毒包裝質(zhì)粒 pCMV-VSV-G |
1 μg/100 μg |
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JY03033/JY03034 |
慢病毒包裝質(zhì)粒 pCMV-dR8.91 |
1 μg/100 μg |
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JY03035/JY03036 |
慢病毒包裝質(zhì)粒 pMDLg/pRRE |
1 μg/100 μg |
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JY03037/JY03038 |
慢病毒包裝質(zhì)粒 pRSV-Rev |
1 μg/100 μg |
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JY10011 |
pLKO.1 puro |
1 μg/100 μg |
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JY10012 |
pLKO.1-EGFP-Puro |
1 μg/100 μg |
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JY10013 |
pLVX-Puro |
1 μg/100 μg |
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JY10014 |
pLenti-puro |
1 μg/100 μg |
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JY03041 |
293T，HEK-293T，人胚腎細(xì)胞 |
> 1×10⁶ cells |
